产品分类

您的位置:首页 > 技术文章 > ELISA试剂盒检测方法的优缺点说明

技术文章

ELISA试剂盒检测方法的优缺点说明

时间:2019-08-15 浏览次数:86

                     ELISA试剂盒检测方法的优缺点说明

大学新生活啦,我把一滴滴拼搏的汗水装进许愿瓶中,把一个个奋斗的足迹画在黄金纸上,把一级级成长的台阶留在照片里,把一个个真心的祝福写到短信里,愿你的大学生活永远快乐。接下来介绍 ELISA试剂盒检测方法的优缺点说明.

一、直接法

将抗原直接固定在固相载体上,加入酶标记的一级抗体,即可测定抗原总量,此一级抗体的特

异性非常重要。

1.优势:操作手续简短,因无须使用二抗可避免交互反应。

2.缺点:试验中的一抗都得用酶标记,但不是每种抗体都适合做标记,费用相对提高。 

二、间接法

此测定方法与直接法类似,差别在于一级抗体没有酶标记,改用酶标记的二级抗体去辨识一级

抗体来测定抗原量。

1.优势:二抗可以加强信号,而且有多种选择能做不同的测定分析。不加酶标记的一级抗体则

能保留它*多的免疫反应性。

2.缺点:交互反应发生的机率较高。

三、双抗体夹心法

被检测的抗原包被在两个抗体之间,其中一个抗体将抗原固定于固相载体上,即捕捉抗体。另

一个则是检测抗体,此抗体可用酶标记后直接测定抗原的量;或不标记,再透过酶标记的二级抗体来测定抗原的量。这两种抗体必须小心选取,才可避免交互反应或竞争相同的抗原结合部位。

1.优势:高灵敏、高专一性,抗原无须事先纯化。

2.缺点:抗原一定得拥有两个以上的抗体结合部位。

四、竞争法

样本里的抗原(自由抗原)和纯化并固定在固相载体上的抗原(固定抗原)一起竞争相同的抗体,

当样品里的自由抗原越多,就可以结合越多的抗体,而固定抗原就只能结合到较少的抗体,反之亦然。经清洗步骤,洗去自由抗原和抗体的复合物,只留下固定抗原和抗体的复合物,拿来与只有固定抗原的对照组结果相比较,根据呈色差异就可计算出样品里的抗原含量。

1.优势:可适用比较不纯的样本,而且数据再现性很高。

2.缺点:整体的敏感性和专一性都较差。

 

五、基于细胞法

是一种新的定性蛋白检测技术,将细胞直接在微孔板里培养,待检测时,不需抽提蛋白和裂解

细胞,便可直接测量微孔板里蛋白经刺激或抑制作用后的变化。

1.优势:无需裂解细胞,所以目标蛋白损失*少,可测定完整细胞、黏附细胞、还有非粘附细

胞。

2.缺点:不能测定抗原量。

在线客服
返回顶部